達(dá)氏鱘（Acipenser dabryanus）是我國特有的一種淡水定居性珍稀魚類。早期達(dá)氏鱘曾是長江上游重要的經(jīng)濟(jì)魚類之一，20世紀(jì)后期由于過度捕撈、水利工程興建、航道整治、挖沙活動等原因，達(dá)氏鱘生存環(huán)境遭到嚴(yán)重破壞，物種處于極度瀕危狀況，已于1988年被列為國家一級保護(hù)動物。因此，其物種保護(hù)、資源增殖的研究亟待加強，尤其在繁殖生物學(xué)方面的研究更是亟需關(guān)注。經(jīng)過十多年的發(fā)展，魚類生殖細(xì)胞移植技術(shù)已成功應(yīng)用到多種魚類，在種質(zhì)資源保存、增殖放流和物種恢復(fù)方面具有重大的應(yīng)用潛力。近年來有關(guān)達(dá)氏鱘精原細(xì)胞移植的研究已取得階段性成果，但高效的移植依賴于精原干細(xì)胞的體外增殖培養(yǎng)。前期我們已開展了達(dá)氏鱘精原細(xì)胞培養(yǎng)方面的工作，但對培養(yǎng)的達(dá)氏鱘精原干細(xì)胞鑒定還有所欠缺。目前，已鑒定的達(dá)氏鱘生殖細(xì)胞標(biāo)記基因有dnd和vasa，但是它們除了在精原細(xì)胞表達(dá)外，在精母細(xì)胞中也有表達(dá)，因此，有必要鑒定在特異類型生殖細(xì)胞表達(dá)的基因，進(jìn)而為體外培養(yǎng)精原干細(xì)胞的鑒定奠定基礎(chǔ)。
    本研究鑒定了兩個生殖細(xì)胞特異表達(dá)的基因：dmc1和ly75，通過RT-PCR 技術(shù)分別克隆得到達(dá)氏鱘dmc1和ly75基因的編碼區(qū)序列，運用生物信息學(xué)方法分析達(dá)氏鱘dmc1和ly75基因編碼的蛋白序列和系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系，借助熒光定量PCR分析這兩個基因在達(dá)氏鱘不同組織中的表達(dá)特征，結(jié)合組織學(xué)結(jié)果進(jìn)一步分析了它們在不同發(fā)育時期精巢的表達(dá)特征，最后通過原位雜交定位技術(shù)對這兩個基因在精巢組織細(xì)胞中的定位進(jìn)行了研究。