中華鱘促性腺激素釋放激素受體基因cDNA序列的克隆及表達(dá)分析
摘要: 為了研究中華鱘(Acipenser sinensis)促性腺激素釋放激素受體(Gonadotropin-releasing hormone receptor,GnRH-R)基因在中華鱘中的組織表達(dá)特征, 為中華鱘生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù), 通過(guò)構(gòu)建中華鱘(Acipenser sinensis)垂體的SMART cDNA質(zhì)粒文庫(kù), 采用cDNA末端快速擴(kuò)增(RACE), 克隆得到了中華鱘GnRH-R基因的cDNA全長(zhǎng)序列。該序列全長(zhǎng)1530 bp, 有478 bp的5'非翻譯區(qū), 579 bp的開放閱讀框和473 bp的3'非翻譯區(qū), 共編碼192個(gè)氨基酸,其成熟多肽含有5個(gè)N連糖基化位點(diǎn)。通過(guò)和已知其他魚類的GnRH-R基因進(jìn)行氨基酸序列多重比對(duì), 發(fā)現(xiàn)其與真鯛(Pagrus major)的同源性最高, 為76%,與米氏葉吻銀鮫(Callorhinchus milii)的同源性最低, 為39%。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real time PCR)方法, 檢測(cè)了GnRH-R的mRNA在中華鱘心、肝、脾、腎、腸道、精巢、肌肉及腦組織中的表達(dá)狀況, 發(fā)現(xiàn)其在精巢中大量轉(zhuǎn)錄, 而在其他組織中則表達(dá)微弱。以上結(jié)果表明中華鱘GnRH-R基因在性腺發(fā)育特別是精子發(fā)生過(guò)程中可能起重要作用。
王桂蘋, 杜合軍, 冷小茜, 李創(chuàng)舉, 曹宏*. 中華鱘促性腺激素釋放激素受體基因cDNA序列的克隆及表達(dá)分析. 水生生物學(xué)報(bào), 2008, 42 (1): 94-98.