摘要：本發明公開了一種中華鱘蛋白抗原及抗體及制備方法和應用,步驟是：1. 重組中華鱘VTG蛋白抗原制備：1）設計上游引物,下游引物,擴增結構域截短序列；2）將pMD-18T-VTG質粒及Pet32a（+）空載體分別采用EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ進行酶切后純化目的片段,將二者連接為Pet32a（+）-VTG轉化DH5a,涂于含有氨芐青霉素的LB培養基上培養；3）將Pet32a（+）-VTG質粒轉化BL21（DE3）感受態細胞,涂于含有氨芐青霉素的LB固體培養基上培養；4）將收集的菌體沉淀,用含8M尿素的蛋白緩沖液重懸沉淀,過濾收集上清得到重組蛋白。2. 重組中華鱘VTG蛋白抗原免疫日本大耳兔獲得中華鱘VTG蛋白抗體。3. 中華鱘VYG蛋白抗原及抗體的用途。中華鱘VTG蛋白抗體與蛋白抗原免疫性好,效價能達到1:1000,檢測結果陽性率高,具有良好的臨床適用性。
